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BC-CL01

BC Trans-DNA plus轉(zhuǎn)染試劑

規(guī)格 1mL/1.5mL
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  • Biochannel
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  • 儲存條件:
  • 2~8℃,12個月
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BC-CL01-1mL ¥2680.00元 咨詢 加入購物車
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商品描述

文獻(xiàn)引用

質(zhì)檢證書(COA)

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【貨號】 BC-CL01

【規(guī)格】 1ml/1.5ml

【保存】 ?2-8℃,12個月

【類型】 ?陽離子聚合物

【產(chǎn)品介紹】

BC Trans-DNA plus是一款專為難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞設(shè)計(jì)的DNA轉(zhuǎn)染試劑,它能夠高效地傳送質(zhì)粒DNA。相較于其他轉(zhuǎn)染試劑,BC Trans-DNA plus擁有卓越的DNA轉(zhuǎn)染能力,其優(yōu)勢在于高轉(zhuǎn)染效率、血清干擾小、低毒性、良好穩(wěn)定性、操作簡便以及出色的可重復(fù)性。

【應(yīng)用范圍】

BC Trans-DNA plus轉(zhuǎn)染試劑表現(xiàn)出廣泛的適用性,能夠高效應(yīng)對多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的DNA轉(zhuǎn)染需求,無論是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染還是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。特別值得一提的是,該試劑在多種貼壁細(xì)胞系中表現(xiàn)出色,尤其對于BMDC、4T1、CT26、DC2.4等難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型,依然能夠?qū)崿F(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率,并且具備良好的重復(fù)性。

【質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染步驟】

請確保所有操作都在無菌條件下進(jìn)行,并遵循實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)范。

以24孔板為例,請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整,步驟如下:

1. 細(xì)胞接種:在細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔接種0.5~1.0×105個細(xì)胞。將細(xì)胞在適宜條件下培養(yǎng)12~24小時(shí),以確保在轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到約60~70%的融合度。

2. DNA稀釋:將所需的質(zhì)粒DNA用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋,使其終濃度達(dá)到0.1mg/mL。

3. 復(fù)合物制備:

(1)取1μL的BC Trans-DNA plus試劑原液,加入9μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。

(2)同時(shí),取4μL濃度為0.1mg/mL的質(zhì)粒DNA,加入6μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。

(3)將上述兩者等體積混合,以形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物。

(4)室溫靜置:讓轉(zhuǎn)染復(fù)合物在室溫下靜置10分鐘,以確保其充分結(jié)合。

4. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞:將20μL的轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻加入到細(xì)胞培養(yǎng)板的每個孔中,并輕輕混勻。

5. 培養(yǎng)與檢測:將細(xì)胞在37℃下繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時(shí)。在此期間,無需更換培養(yǎng)基。

【質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化】

可通過改變細(xì)胞密度、 DNA濃度以及BC Trans-DNA plus濃度對轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上,BC Trans-DNA plus (μL):DNA (μg)可以在2:1和5:1之間調(diào)整。

表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量

培養(yǎng)板


接種

培養(yǎng)基

Opti-MEM稀

釋后終體積

DNA轉(zhuǎn)染

試劑用量

DNA

96孔板

0.3cm2

200μL

10μL

0.5μL

0.2μg

24孔板

2.0cm2

500μL

20μL

1μL

0.4μg

12孔板

4.0cm2

1mL

40μL

2.5μL

1μg

6孔板

10.0cm2

2mL

100μL

5μL

2μg

60mm

20.0cm2

5mL

0.2mL

10μL

4.0μg

10cm

60.0cm2

15mL

0.6mL

30μL

12μg