BC-CL05 |
BC Trans-Universal轉(zhuǎn)染試劑 |
規(guī)格 | 1mL/1.5mL |
產(chǎn)品編號(hào) | 銷(xiāo)售價(jià) | 促銷(xiāo)價(jià) | 庫(kù)存 | 數(shù)量 | 單位 | 加入購(gòu)物車(chē) |
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【貨號(hào)】 BC-CL05
【規(guī)格】 1ml/1.5ml
【保存】 ?2-8℃,12個(gè)月
【類(lèi)型】 ?陽(yáng)離子聚合物
【產(chǎn)品介紹】
BC Trans-Universal是一款高性能、高品質(zhì)的通用型基因轉(zhuǎn)染試劑,既可用于轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA,又具有較強(qiáng)的RNA轉(zhuǎn)染能力。BC Trans-Universal具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡(jiǎn)單易行、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
【應(yīng)用范圍】
BC Trans-Universal轉(zhuǎn)染試劑可適用于眾多較難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的DNA/siRNA轉(zhuǎn)染、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。適用于多種貼壁細(xì)胞,特別適用于各種較難轉(zhuǎn)細(xì)胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等,均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率,且重復(fù)性好。
【?質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染步驟】
1. 質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染:
以24孔板為例,請(qǐng)參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整,步驟如下:
(1)?細(xì)胞接種: 每孔接種0.5~1.0×105個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)12~24小時(shí),使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到60~70%融合度
(2)?質(zhì)粒稀釋: 將0.4μg質(zhì)粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中,終體積10μL
(3)?復(fù)合物制備: 按比例取適量BC Trans-Universal稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中, 終體積10μL,室溫孵育5分鐘后與質(zhì)粒稀釋液混勻
(4)室溫靜置20分鐘
(5)?每孔20μL 復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板中,混勻,37℃培養(yǎng)18~48小時(shí)后檢測(cè)基因表達(dá),無(wú)需更換培養(yǎng)基
2.?siRNA的轉(zhuǎn)染
轉(zhuǎn)染步驟與DNA相同,請(qǐng)參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模進(jìn)行調(diào)整,所有數(shù)量和體積均是按孔計(jì)算。轉(zhuǎn)染高密度細(xì)胞可獲得高轉(zhuǎn)染效率、高表達(dá)水平和低細(xì)胞毒性。
【質(zhì)粒DNA和siRNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化】
可通過(guò)改變細(xì)胞密度、 DNA/siRNA濃度以及BC Trans-Universal濃度對(duì)轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上,BC Trans-Universal (μL): DNA (μg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整;BC Trans-Universal (μL): siRNA(pmol)可以在0.02:1和0.15:1之間調(diào)整。
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表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA/siRNA的用量